HPLC高效液相色譜儀也叫高壓液相色譜、高速液相色譜、高分離度液相色譜等，它是在經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，于60年代后期引入了氣相色譜理論而迅速發(fā)展起來的。它與經(jīng)典液相色譜法的區(qū)別是填料顆粒小而均勻，小顆粒具有高柱效，但會引起高阻力，需用高壓輸送流動(dòng)相，故又稱高壓液相色譜。又因分析速度快而稱為高速液相色譜。
HPLC高效液相色譜儀的儲液器中的流動(dòng)相被高壓泵打入系統(tǒng)，樣品溶液經(jīng)進(jìn)樣器進(jìn)入流動(dòng)相，被流動(dòng)相載入色譜柱內(nèi)，由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數(shù)，因此在兩相中作相對運(yùn)動(dòng)時(shí)，經(jīng)過反復(fù)多次的吸附-解吸的分配過程，各組分在移動(dòng)速度上產(chǎn)生較大的差別，被分離成單個(gè)組分依次從柱內(nèi)流出，通過檢測器時(shí)，樣品濃度被轉(zhuǎn)換成電信號傳送到記錄儀，數(shù)據(jù)以圖譜形式打印出來。
HPLC高效液相色譜器一般由溶劑輸送系統(tǒng)、進(jìn)樣系統(tǒng)、分離系統(tǒng)（色譜柱）、檢測系統(tǒng)和數(shù)據(jù)處理與記錄系統(tǒng)組成，具體包括儲液器、輸液泵、進(jìn)樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀或數(shù)據(jù)工作站等幾部分。其中輸液泵、色譜柱和檢測器是HPLC高效液相色譜儀的關(guān)鍵部分。
1、溶劑輸送系統(tǒng)
①儲液器：用來貯存數(shù)量足夠、符合要求的流動(dòng)相。配有溶劑過濾器，以防止流動(dòng)相中的顆粒進(jìn)入泵內(nèi)。
②脫氣器：脫氣的目的是為了防止流動(dòng)相從色譜柱內(nèi)流出時(shí)釋放出氣泡進(jìn)入檢測器，從而引起噪聲，不能正常檢測。
③輸液泵：將儲液器中的流動(dòng)相連續(xù)不斷地以高壓形式進(jìn)入液路系統(tǒng)，使樣品在色譜柱中完成分離過程。
④梯度洗脫裝置：是在分離過程中通過逐漸改變流動(dòng)相的組成增加洗脫能力的一種裝置。
2、進(jìn)樣系統(tǒng)
進(jìn)樣器：是將樣品送入色譜柱的裝置，進(jìn)樣方式可以分為兩種：閥進(jìn)樣或自動(dòng)進(jìn)樣。比較常用的是采用自動(dòng)進(jìn)樣器裝樣。
3、分離系統(tǒng)
色譜柱：對樣品進(jìn)行分離，是整個(gè)色譜系統(tǒng)的心臟，它的質(zhì)量優(yōu)劣直接影響到分離的效果。
4、檢測系統(tǒng)
檢測器：將色譜柱連續(xù)流出的樣品組分轉(zhuǎn)變成易于測量的電信號，被數(shù)據(jù)系統(tǒng)接收，得到樣品分離的色譜圖。
5、數(shù)據(jù)處理和記錄系統(tǒng)
對色譜數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，并參與HPLC高效液相色譜儀器的自動(dòng)控制。
